pCold I

價格:800元

聯系方式:I47-825O-882O

買家導航

pColdI pCold1載體基本信息

出品公司: Takara
載體名稱: pCold I, pColdI, pCold1, pCold-I
質粒類型: 大腸桿菌蛋白表達載體
表達水平:
啟動子: CSPA
克隆方法: 多克隆位點,限制性內切酶
載體大小: 4407 bp
5' 測序引物及序列: pCold-F: 5'-ACGCCATATCGCCGAAAGG-3'
3' 測序引物及序列: pCold-R: 5'-GGCAGGGATCTTAGATTCTG-3'
載體標簽: N-His, N-Factor Xa
載體抗性: Ampicillin 氨芐
備注:
溫度誘導,冷休克蛋白表達載體
產品目錄號: 3361
穩定性: 瞬時表達 Transient
組成型: 誘導表達
病毒/非病毒: 非病毒

pColdI pCold1載體質粒圖譜和多克隆位點信息

pCold I載體圖譜

pCold I多克隆位點

pColdI pCold1載體簡介

闡明蛋白質的結構和功能是后基因組研究的一個重要課題。高效率的蛋白質表達系統是研究這些課題的不可缺少的基本技術。大腸桿菌作為宿主的表達系統中被廣泛使用于生產重組蛋白。大腸桿菌表達系統具有良好的優勢,方法簡單,成本低。然而,對于某些基因,蛋白表達很困難,表達的蛋白質不溶。

為了解決這些問題,TAKARA與Masayori Inouye教授(美國新澤西醫學和牙科大學)進行聯合研究,以制定一個高效基于低溫冷休克蛋白基因的大腸桿菌表達載體。pCold DNA系列產品具有上述的優點,并提供了一個重要功能和結構的分析以及其他蛋白質研究領域的工具。

<產品概況和特點>
當培養的大腸桿菌的溫度充分降低,幾乎暫時停止生長大部分的蛋白表達減少,而此時一組蛋白質稱為“冷休克蛋白”被專門誘導表達。

冷休克表達載體,pCold I-IV,是利用冷休克基因CSPA啟動子設計高效率蛋白質表達載體。 CSPA的啟動子的下游處,插入了lac操縱子,以便嚴格控制表達。此外,5'非翻譯區(5'UTR),翻譯增強元件(TEE),His標簽序列,Xa因子切割位點和多克隆位點(MCS)位于在CSPA啟動子的下游的。由于該產品采用了大腸桿菌的啟動子,大多數大腸桿菌菌株可被用作表達宿主。有四種類型的pCold載體,他們的下列原件的位置稍有不同,TEE,His標簽序列和Factor XA酶切位點。

pColdI pCold1載體序列

LOCUS       pCold\I                4407 bp    DNA     circular SYN 10-AUG-2004
DEFINITION  Expression vector pColdI DNA, complete sequence.
ACCESSION   AB186388
VERSION     AB186388.1  GI:51090247
KEYWORDS    .
SOURCE      Expression vector pColdI
  ORGANISM  Expression vector pColdI
            other sequences; artificial sequences; vectors.
COMMENT     This file is created by Vector NTI
            http://www.vpiqnf.icu/
COMMENT     VNTAUTHORNAME|biofeng.com|
FEATURES             Location/Qualifiers
     source          1..4407
                     /organism="Expression vector pColdI"
                     /mol_type="other DNA"
                     /db_xref="taxon:289229"
                     /lab_host="Escherichia coli"
                     /note="expresses an open reading frame as a factor Xa
                     cleavable fusion to a His6 containing translation
                     enhancing element. This plasmid is derived from pUC118."
     gene            15..512
                     /gene="cspA"
     promoter        15..81
                     /gene="cspA"
     misc_feature    82..121
                     /gene="cspA"
                     /note="synthetic lac operator sequence"
     5'UTR           122..255
                     /gene="cspA"
                     /note="modified cspA 5'UTR"
     misc_feature    256..270
                     /gene="cspA"
                     /note="TEE (translation enhancing element)"
     misc_feature    271..288
                     /gene="cspA"
                     /note="His6 tag"
     misc_feature    289..300
                     /gene="cspA"
                     /note="Factor Xa site"
     misc_feature    301..360
                     /gene="cspA"
                     /note="MCS = Multiple cloning sites contain the follow
                     restriction sites: NdeI, SacI, KpnI, XhoI, BamHI, EcoRI,
                     HindIII, SalI, PstI, XbaI"
     3'UTR           368..512
                     /gene="cspA"
                     /note="cspA 3'UTR"
     misc_feature    complement(711..1184)
                     /note="M13 intergenic region"
     gene            1371..2231
                     /gene="Amp"
     CDS             1371..2231
                     /gene="Amp"
                     /codon_start=1
                     /transl_table=11
                     /product="beta-lactamase"
                     /protein_id="BAD35134.1"
                     /db_xref="GI:51090248"
                     /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGY
                     IELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVE
                     YSPVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRL
                     DRWEPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPL
                     LRSALPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIA
                     EIGASLIKHW"
     rep_origin      2391..3005
                     /note="ColE1 origin"
     gene            complement(3162..4244)
                     /gene="lacI"
     CDS             complement(3162..4244)
                     /gene="lacI"
                     /codon_start=1
                     /transl_table=11
                     /product="lactose operon repressor"
                     /protein_id="BAD35135.1"
                     /db_xref="GI:51090249"
                     /translation="MKPVTLYDVAEYAGVSYQTVSRVVNQASHVSAKTREKVEAAMAE
                     LNYIPNRVAQQLAGKQSLLIGVATSSLALHAPSQIVAAIKSRADQLGASVVVSMVERS
                     GVEACKAAVHNLLAQRVSGLIINYPLDDQDAIAVEAACTNVPALFLDVSDQTPINSII
                     FSHEDGTRLGVEHLVALGHQQIALLAGPLSSVSARLRLAGWHKYLTRNQIQPIAEREG
                     DWSAMSGFQQTMQMLNEGIVPTAMLVANDQMALGAMRAITESGLRVGADISVVGYDDT
                     EDSSCYIPPLTTIKQDFRLLGQTSVDRLLQLSQGQAVKGNQLLPVSLVKRKTTLAPNT
                     QTASPRALADSLMQLARQVSRLESGQ"
ORIGIN      
        1 aaggaatggt gtggccgatt aatcataaat atgaaaaata attgttgcat cacccgccaa
       61 tgcgtggctt aatgcacatc aaattgtgag cggataacaa tttgatgtgc tagcgcatat
      121 ccagtgtagt aaggcaagtc ccttcaagag ttatcgttga tacccctcgt agtgcacatt
      181 cctttaacgc ttcaaaatct gtaaagcacg ccatatcgcc gaaaggcaca cttaattatt
      241 aagaggtaat acaccatgaa tcacaaagtg catcatcatc atcatcatat cgaaggtagg
      301 catatggagc tcggtaccct cgagggatcc gaattcaagc ttgtcgacct gcagtctaga
      361 taggtaatct ctgcttaaaa gcacagaatc taagatccct gccatttggc ggggattttt
      421 ttatttgttt tcaggaaata aataatcgat cgcgtaataa aatctattat tatttttgtg
      481 aagaataaat ttgggtgcaa tgagaatgcg caggcccttt cgtctcgcgc gtttcggtga
      541 tgacggtgaa aacctctgac acatgcagct cccggagacg gtcacagctt gtctgtaagc
      601 ggatgccggg agcagacaag cccgtcaggg cgcgtcagcg ggtgttggcg ggtgtcgggg
      661 ctggcttaac tatgcggcat cagagcagat tgtactgaga gtgcaccata aaattgtaaa
      721 cgttaatatt ttgttaaaat tcgcgttaaa tttttgttaa atcagctcat tttttaacca
      781 ataggccgaa atcggcaaaa tcccttataa atcaaaagaa tagcccgaga tagggttgag
      841 tgttgttcca gtttggaaca agagtccact attaaagaac gtggactcca acgtcaaagg
      901 gcgaaaaacc gtctatcagg gcgatggccc actacgtgaa ccatcaccca aatcaagttt
      961 tttggggtcg aggtgccgta aagcactaaa tcggaaccct aaagggagcc cccgatttag
     1021 agcttgacgg ggaaagccgg cgaacgtggc gagaaaggaa gggaagaaag cgaaaggagc
     1081 gggcgctagg gcgctggcaa gtgtagcggt cacgctgcgc gtaaccacca cacccgccgc
     1141 gcttaatgcg ccgctacagg gcgcgtacta tggttgcttt gacgtatgcg gtgtgaaata
     1201 ccgcacagat gcgtaaggag aaaataccgc atcaggcgtc aggtggcact tttcggggaa
     1261 atgtgcgcgg aacccctatt tgtttatttt tctaaataca ttcaaatatg tatccgctca
     1321 tgagacaata accctgataa atgcttcaat aatattgaaa aaggaagagt atgagtattc
     1381 aacatttccg tgtcgccctt attccctttt ttgcggcatt ttgccttcct gtttttgctc
     1441 acccagaaac gctggtgaaa gtaaaagatg ctgaagatca gttgggtgca cgagtgggtt
     1501 acatcgaact ggatctcaac agcggtaaga tccttgagag ttttcgcccc gaagaacgtt
     1561 ttccaatgat gagcactttt aaagttctgc tatgtggcgc ggtattatcc cgtattgacg
     1621 ccgggcaaga gcaactcggt cgccgcatac actattctca gaatgacttg gttgagtact
     1681 caccagtcac agaaaagcat cttacggatg gcatgacagt aagagaatta tgcagtgctg
     1741 ccataaccat gagtgataac actgcggcca acttacttct gacaacgatc ggaggaccga
     1801 aggagctaac cgcttttttg cacaacatgg gggatcatgt aactcgcctt gatcgttggg
     1861 aaccggagct gaatgaagcc ataccaaacg acgagcgtga caccacgatg cctgtagcaa
     1921 tggcaacaac gttgcgcaaa ctattaactg gcgaactact tactctagct tcccggcaac
     1981 aattaataga ctggatggag gcggataaag ttgcaggacc acttctgcgc tcggcccttc
     2041 cggctggctg gtttattgct gataaatctg gagccggtga gcgtgggtct cgcggtatca
     2101 ttgcagcact ggggccagat ggtaagccct cccgtatcgt agttatctac acgacgggga
     2161 gtcaggcaac tatggatgaa cgaaatagac agatcgctga gataggtgcc tcactgatta
     2221 agcattggta actgtcagac caagtttact catatatact ttagattgat ttaaaacttc
     2281 atttttaatt taaaaggatc taggtgaaga tcctttttga taatctcatg accaaaatcc
     2341 cttaacgtga gttttcgttc cactgagcgt cagaccccgt agaaaagatc aaaggatctt
     2401 cttgagatcc tttttttctg cgcgtaatct gctgcttgca aacaaaaaaa ccaccgctac
     2461 cagcggtggt ttgtttgccg gatcaagagc taccaactct ttttccgaag gtaactggct
     2521 tcagcagagc gcagatacca aatactgttc ttctagtgta gccgtagtta ggccaccact
     2581 tcaagaactc tgtagcaccg cctacatacc tcgctctgct aatcctgtta ccagtggctg
     2641 ctgccagtgg cgataagtcg tgtcttaccg ggttggactc aagacgatag ttaccggata
     2701 aggcgcagcg gtcgggctga acggggggtt cgtgcacaca gcccagcttg gagcgaacga
     2761 cctacaccga actgagatac ctacagcgtg agctatgaga aagcgccacg cttcccgaag
     2821 ggagaaaggc ggacaggtat ccggtaagcg gcagggtcgg aacaggagag cgcacgaggg
     2881 agcttccagg gggaaacgcc tggtatcttt atagtcctgt cgggtttcgc cacctctgac
     2941 ttgagcgtcg atttttgtga tgctcgtcag gggggcggag cctatggaaa aacgccagca
     3001 acgcggcctt tttacggttc ctggcctttt gctggccttt tgctcacata gtcatgcccc
     3061 gcgcccaccg gaaggagctg actgggttga aggctctcaa gggcatcggt cgagatcccg
     3121 gtgcctaatg agtgagctaa cttacattaa ttgcgttgcg ctcactgccc gctttccagt
     3181 cgggaaacct gtcgtgccag ctgcattaat gaatcggcca acgcgcgggg agaggcggtt
     3241 tgcgtattgg gcgccagggt ggtttttctt ttcaccagtg agacgggcaa cagctgattg
     3301 cccttcaccg cctggccctg agagagttgc agcaagcggt ccacgctggt ttgccccagc
     3361 aggcgaaaat cctgtttgat ggtggttaac ggcgggatat aacatgagct gtcttcggta
     3421 tcgtcgtatc ccactaccga gatatccgca ccaacgcgca gcccggactc ggtaatggcg
     3481 cgcattgcgc ccagcgccat ctgatcgttg gcaaccagca tcgcagtggg aacgatgccc
     3541 tcattcagca tttgcatggt ttgttgaaaa ccggacatgg cactccagtc gccttcccgt
     3601 tccgctatcg gctgaatttg attgcgagtg agatatttat gccagccagc cagacgcaga
     3661 cgcgccgaga cagaacttaa tgggcccgct aacagcgcga tttgctggtg acccaatgcg
     3721 accagatgct ccacgcccag tcgcgtaccg tcttcatggg agaaaataat actgttgatg
     3781 ggtgtctggt cagagacatc aagaaataac gccggaacat tagtgcaggc agcttccaca
     3841 gcaatggcat cctggtcatc cagcggatag ttaatgatca gcccactgac gcgttgcgcg
     3901 agaagattgt gcaccgccgc tttacaggct tcgacgccgc ttcgttctac catcgacacc
     3961 accacgctgg cacccagttg atcggcgcga gatttaatcg ccgcgacaat ttgcgacggc
     4021 gcgtgcaggg ccagactgga ggtggcaacg ccaatcagca acgactgttt gcccgccagt
     4081 tgttgtgcca cgcggttggg aatgtaattc agctccgcca tcgccgcttc cactttttcc
     4141 cgcgttttcg cagaaacgtg gctggcctgg ttcaccacgc gggaaacggt ctgataagag
     4201 acaccggcat actctgcgac atcgtataac gttactggtt tcacattcac caccctgaat
     4261 tgactctctt ccgggcgcta tcatgccata ccgcgaaagg ttttgcgcca ttcgatggtg
     4321 tccgggatct cgacgctctc ccttatgcga ctcctgcatt aggaagcagc ccagtagtag
     4381 gttgaggccg ttgagcaccg ccgccgc
//

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