硝酸鹽肉湯

價格:

規格: 100g 20支

聯系方式:I47-825O-882O

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Nitrate Broth產品基本信息

產品名稱: 硝酸鹽肉湯
英文名稱: Nitrate Broth
培養基類型: 鑒別培養基
級別: for microbiology
品牌: ELITE-MEDIA
產品目錄號: M1124-01、M1124-02、M1124-03
產品規格: 100g、20支、250g
產品外觀: 黃棕色均一粉末。
顏色與澄清度: 淺-中等琥珀色透明溶液。
保存條件: 密封,2-25度保存。
注意事項: 避免呼入和皮膚接觸。
相關產品: 硝酸鹽試劑(Nitrate Reagents)


產品描述:

硝酸鹽肉湯(Nitrate Broth)是硝酸鹽還原試驗用培養基,推薦用于輔助鑒別好氧型和兼性厭氧型革蘭氏陰性菌。


原理:

微生物可以通過它們代謝某些底物來進行鑒別。將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽是腸桿菌科家族的特征性能力。非發酵菌和其它各種各樣的革蘭氏陰性桿菌還原硝酸鹽的能力各有不同。有些成員具有脫氮能力,可將硝酸鹽最終還原為氮氣。這種由硝酸鹽產氣的能力對于非葡萄糖發酵型革蘭氏陰性桿菌來說是一項非常重要的鑒別特征。還原反應的終產物取決于細菌菌種。

硝酸鹽肉湯是一種含有硝酸鉀的培養基基礎。待測的微生物接種到該培養基中,經過培養后,可以確定硝酸鹽還原情況。培養基中的倒置德拉姆管用于收集脫氮產生的氮氣。通過向培養基中加入兩種試劑:硝酸鹽試劑A(0.8%對氨基苯磺5N醋酸溶液)和硝酸鹽試劑B(0.6% N,N-二甲基-α萘胺5N醋酸溶液), 來檢測硝酸鹽還原產物。硝酸鹽試劑C來驗證培養基中是否還剩余硝酸鹽。

硝酸鹽還原過程一般來說是一種厭氧呼吸,在這一過程中微生物從硝酸鹽中獲取氧。這一代謝過程的終產物通常不會進一步氧化或者同化到細胞代謝中去,而是分泌到細胞外的培養基中。但這取決于環境條件。腸桿菌科特征性地還原硝酸鹽為亞硝酸鹽,后者與對氨基苯磺和N,N-二甲基-α萘胺反應產生紅色物質(Griess反應)。硝酸鹽還原也可能產生其它終產物,如氨、一氧化二氮、羥胺等,因此另外還要加入鋅粉來檢測是否有沒被還原的硝酸鹽存在。



配方與配制方法:

成分 g/L
Beef Extract 3.0
Peptone 4.0
Proteose Peptone No.3 1.0
KNO3 1.0
pH 7.0±0.2  

配制方法:
用1L蒸餾水溶解9g硝酸鹽肉湯培養基。
分裝5ml培養基到16×125 mm或15×103 mm試管中。
121°C高溫蒸汽滅菌15min。



實驗方法:

在接種硝酸鹽肉湯之前,待測微生物必須從合適的固體培養基上進行分離。使用純培養物對于試驗的有效性是十分關鍵的。
用無菌接種環從瓊脂培養基上移取幾個相似的單菌落,接種到硝酸鹽肉湯中。松松的蓋上管蓋。35-37°C培養。 分別在培養18-24h和42-48h時檢查生長情況及德拉姆管中是否有氣體存在。如果培養24-48h后,有氣體存在,且待測微生物為非發酵菌,則脫氮試驗結果陽性。如果該微生物為發酵菌,氣體可能存在也可能不存在,加入10滴硝酸鹽試劑A盒10滴硝酸鹽試劑B。如果在2min內有紅色反應,則表明有亞硝酸鹽存在。如果培養基不變色,用敷藥棒加入少量(約20mg)硝酸鹽試劑C。如果在5-10min內沒有顏色變化,說明硝酸鹽已經被還原成比亞硝酸鹽更低的產物了,硝酸鹽反應陽性。如果出現紅色,說明試驗結果為陰性。

注意事項:
亞硝酸鹽測試是非常靈敏的,因此應該用未接種的培養基做空白對照,以確定培養基中不含有亞硝酸鹽,玻璃器皿和試劑沒有被一氧化二氮污染。
加入過多的鋅粉會導致假陰性反應或者一閃即逝的顏色反應。


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