Origami(DE3)pLysS

價格:1500元

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感受態細胞基本信息

出品公司: Novagen/ Millipore
感受態細胞名稱: Origami(DE3), Origami DE3, Origami-DE3
菌株類型: E.coli
產品貨號: 70628
培養基: LB培養基
生長條件: 37 ℃,  有氧
基因型: Origami(DE3)pLysS感受態細胞基因型
抗性: 卡那,鏈霉素,四環素,氯霉素
質粒轉化條件: 42 ℃熱激
應用: 蛋白表達, 含二硫鍵蛋白表達
誘導方法: IPTG
菌株特點:
Origami系列感受態細胞是K-12細胞的衍生而來,在thioredoxin reductase (trxB)和glutathione reductase (gor)基因上同時含有突變,這使得該菌株能夠更加高效的在細胞質內生成二硫鍵,有助于含二硫鍵蛋白的活性蛋白形成。研究表明使用Origami系列的 感受態細胞表達獲得的活性二硫鍵蛋白比其他同類感受態細胞要多10倍左右。

Origami系列感受態細胞能夠用于氨芐抗性質粒的蛋白表達,尤其是和pET32a載體能夠完美搭配使用。pET32a載體含有thioredoxin (TRX)融合標簽,能夠高效提升胞質內蛋白二硫鍵的形成。

TrxB和Gor基因突變使得質粒能夠分別具有卡那和四環素抗性,所以本菌株無法用于卡那和四環素抗性質粒的蛋白表達。為了減少細胞內多種分子間的二硫鍵的形成,含有TrxB和Gor基因突變的宿主菌被建議用于含二硫鍵正確折疊 蛋白的高效表達。

DE3是溶源性的 λDE3, 所以在lacUV5啟動子下攜帶有T7 RNA聚合酶的染色體拷貝。該菌株適用于pET系列載體,及其他T7啟動子系列載體。

含有pLSs質粒,pLySs質粒能夠產生T7溶菌酶,可以有效降低目的基因的基礎表達水平。pLySs質粒使得該菌株具有氯霉素抗性。pLySs質粒的起始復制位點是p15 Origin, 這使得該質粒能夠和pUC-及pBR322-衍生的質粒互相共存。

亮氨酸缺陷型菌株。

感受態細胞特點和簡介

感受態細胞制備方法

感受態細胞操作方法

感受態細胞注意事項

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感受態細胞應用舉例

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