N1E-115細胞ATCC CRL-2263

價格:2500元

聯系方式:I47-825O-882O

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N1E-115細胞ATCC CRL-2263標準細胞株基本信息

出品公司: ATCC
細胞名稱: N1E-115細胞, ATCC CRL-2263細胞, N1E115細胞, 小鼠神經母細胞瘤
細胞又名: N1E115; NIE-115; NIE 115
存儲人: E Richelson
種屬來源: 小鼠
組織來源: 神經
疾病特征: 神經母細胞瘤
細胞形態: 上皮細胞樣
生長特性: 貼壁生長
培養基: DMEM培養基,90%;FBS,10%。
產品目錄號: CRL-2263
生長條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%; 溫度:37 ℃, 
傳代方法: 1:2至1:6,每周2次。
凍存條件: 90% 完全培養基+10% DMSO,液氮儲存
支原體檢測: 陰性
安全等級: 1
應用: 該細胞可以作為轉染宿主細胞。
參考文獻:
. Methods in neurotransmitter receptor analysis. New York: Raven Press; 1990.
 
Richelson E. The use of cultured cells in the study of mood-normalizing drugs. Pharmacol. Toxicol. 66 suppl.3: 69-75, 1990. PubMed: 2179933
 
Amano T, et al. Neurotransmitter synthesis by neuroblastoma clones (neuroblast differentiation-cell culture-choline acetyltransferase- acetylcholinesterase-tyrosine hydroxylase-axons-dendrites). Proc. Natl. Acad. Sci. USA 69: 258-263, 1972. PubMed: 4400294
 
Richelson E. Regulation of tyrosine hydroxylase activity in mouse neuroblastoma clone N1E-115. J. Neurochem. 21: 1139-1145, 1973. PubMed: 4148612
 
細胞圖片:
N1E-115細胞圖片

N1E-115細胞ATCC CRL-2263小鼠神經母細胞瘤接受后處理

1) 收到細胞后,請檢查是否漏液 ,如果漏液,請拍照片發給我們。

 2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長 狀態,去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。

 3) 棄去T25瓶中的培養基,添加 6ml本公司附帶的完全培養基。

 4) 如果細胞密度達80%-90%請及 時進行細胞傳代,傳代培養用6ml本公司附帶的完全培養基。

 5) 接到細胞次日,請檢查細胞是 否污染,若發現污染或疑似污染,請及時與我們取得聯系。
 

N1E-115細胞ATCC CRL-2263小鼠神經母細胞瘤培養操作

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

 2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。      
   
     1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

     2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。  
   
     3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。

     4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

 3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

    1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

    2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

    3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

N1E-115細胞ATCC CRL-2263小鼠神經母細胞瘤培養注意事項

 1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現 象發生請及 時和我們聯系。
 
 2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所 需細胞因子 等,確保細胞培養條件一致。若由于培養條件不一致而導致細胞出現問 題,責任由客戶自行承擔。

 3.   用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶 壁脫落,將細胞置于培養箱內靜置培養 4~6 小時,再取出觀察。此時多數細胞均 會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常, 請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養;如果染色結果顯示細胞無活 力,請拍下 照片及時和我們聯系,信息確認后我們為您再免費寄送一次。

 4.   靜置細胞貼壁后,請將細胞瓶內的培養基倒出,留 6~8mL 維持細胞正常培養,待細 胞匯 合度  80%左右時正常傳代。

 5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用,細胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養基混合,使細胞逐漸適應培養條件。

 6.   建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和 Procell 技術 部 溝通交流。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯 系,告知細胞的具體情況,以便我們 的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

 7.該細胞僅供科研使用。


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N1E-115細胞ATCC CRL-2263標準細胞株應用舉例

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